尼康顯微鏡參數(shù)中,很多朋友不是很清楚尼康顯微鏡分辨率跟放大率的區(qū)別,而且還以為放大率是越大越好的,其實(shí)不是的,放大率也分有效放大率跟無(wú)效放大率的,那么它們有什么區(qū)別呢,下面我們來(lái)仔細(xì)說(shuō)說(shuō)。
一、尼康顯微鏡的分辨率
是指能被尼康顯微鏡清晰區(qū)分的兩個(gè)物點(diǎn)的較小間距,又稱"鑒別率"。
其計(jì)算公式是σ=λ/NA
公式中σ為較小分辨距離;λ為光線的波長(zhǎng);NA
為物鏡的數(shù)值孔徑??梢?jiàn)物鏡的分辨率是由物鏡的NA
值與照明光源的波長(zhǎng)兩個(gè)因素決定。NA值越大,照明光線波長(zhǎng)越短,則σ值越小,分辨率就越高。
要提高分辨率,即減小σ值,可采取以下措施:
(1)降低波長(zhǎng)λ值,使用短波長(zhǎng)光源。
?。?)增大介質(zhì)n值以提高NA值(NA=nsinu/2)。
?。?)增大孔徑角u值以提高NA值。
?。?)增加明暗反差。
二、尼康顯微鏡的放大率和有效放大率
由于經(jīng)過(guò)物鏡和目鏡的兩次放大,所以尼康顯微鏡總的放大率Γ應(yīng)該是物鏡放大率β和目鏡放大率Γ1的乘積:
Γ=βΓ1
顯然,和放大鏡相比,尼康顯微鏡可以具有高得多的放大率,并且通過(guò)調(diào)換不同放大率的物鏡和目鏡,能夠方便地改變尼康顯微鏡的放大率。
放大率也是尼康顯微鏡的重要參數(shù),但也不能盲目相信放大率越高越好。尼康顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率。
分辨率和放大倍率是兩個(gè)不同的但又互有聯(lián)系的概念。
關(guān)系式:500NA<Γ<1000NA
當(dāng)選用的物鏡數(shù)值孔徑不夠大,即分辨率不夠高時(shí),尼康顯微鏡不能分清物體的微細(xì)結(jié)構(gòu),此時(shí)即使過(guò)度地增大放大倍率,得到的也只能是一個(gè)輪廓雖大但細(xì)節(jié)不清的圖像,稱為無(wú)效放大倍率。反之如果分辨率已滿足要求而放大倍率不足,則尼康顯微鏡雖已具備分辨的能力,但因圖像太小而仍然不能被人眼清晰視見(jiàn)。所以為了充分發(fā)揮尼康顯微鏡的分辨能力,應(yīng)使數(shù)值孔徑與尼康顯微鏡總放大倍率合理匹配。